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生物信息分析

 發(fā)布時(shí)間:2019/3/5 點(diǎn)擊量:1317

高通量測序信息分析
 
分析過(guò)程
1、測序儀下機原始數據使用Illumina CASAVA1.8將.bcl轉換成.FastQ文件。
2、使用BWA,Samtools和Picard軟件將reads比對到人類(lèi)參考基因組GRCh37/hg19。
3、生成.bam文件采用GATK系列軟件進(jìn)行局部重新比對,重復序列去除并進(jìn)行變異檢出。
4、使用Annovar對.vcf變異文件進(jìn)行變異注釋。
 
致病變異位點(diǎn)篩選原則
(1)篩選出外顯子區變異、非同義突變位點(diǎn)。
(2)ExAC_EAS、ExAC_ALL、1000Genomes等數據庫中未見(jiàn)正常人攜帶或攜帶率小于1%。
(3)參考dbSNP、OMIM、HGMD、ClinVar等多種數據庫對致病變異位點(diǎn)進(jìn)行評估。
(4)使用SIFT、Polyphen2、LRT、MutationTaster、FATHMM等多種蛋白功能預測軟件進(jìn)行基因變異導致蛋白功能預測。根據ACMG分類(lèi)指南以及病人的臨床表型進(jìn)行致病變異的篩選。
測序數據分析策略
1、分析患病樣本中是否存在已知基因的致病突變,特別是發(fā)現的致病基因。
2、通過(guò)每個(gè)外顯子測序深度集合測序數據量,分析在患病個(gè)體中已知致病基因是否存在整個(gè)外顯子的缺失或重復。
3、尋找新致病基因,按照單基因遺傳病分析思路,使用VAAST算法尋找新的致病基因,VAAST主要原理是結合家系信息、遺傳模式、序列保守性、位點(diǎn)頻率、氨基酸替換matrix及危害性預測在基因水平對候選位點(diǎn)進(jìn)行排序,排序越高,致病可能性越大,不僅可評估SNP,還可以評估Indel和splicing變異。
4、已知基因的罕見(jiàn)位點(diǎn)關(guān)聯(lián)分析,分別統計異位組與正常對照組在已知相關(guān)基因上是否存在罕見(jiàn)位點(diǎn)的分布差異。
5、罕見(jiàn)位點(diǎn)關(guān)聯(lián)分析,通過(guò)EPACTS軟件在全基因組基因水平尋找病例組與正常對照組的同義變異,罕見(jiàn)非同義變異(包括錯義突變、移碼突變、可變剪接變異、無(wú)義突變及stopgain變異),以及罕見(jiàn)有害突變(REVEL或MCAP認為有害)。
6、蛋白互作通路分析,分別比較病例組與正常對照組,是否在相關(guān)通路中存在顯著(zhù)性差異。
分析內容
6000余種遺傳代謝病分析
近百種腫瘤疾病,包括乳腺癌BRCA1/2等項目分析
近千項個(gè)人特征,包括營(yíng)養代謝、運動(dòng)機能、過(guò)敏等分析
數百種藥物基因分析
我們的優(yōu)勢
1、提供各種實(shí)驗材料和儀器,滿(mǎn)足項目課題實(shí)驗需要。
2、專(zhuān)業(yè)的實(shí)驗和數據分析人員。
3、高規格實(shí)驗室。
4、數據結果交付周期快。
5、完善的服務(wù)體系,全程跟進(jìn),確保滿(mǎn)意。
服務(wù)流程
1、提交項目課題相關(guān)需求和資料。
2、與我們的專(zhuān)業(yè)技術(shù)團隊討論項目細節。
3、根據討論后的意見(jiàn)對實(shí)驗方案進(jìn)行修改。 
4、雙方均滿(mǎn)意并達成一致,簽訂技術(shù)服務(wù)合同。
5、開(kāi)展實(shí)驗,按期完成合同規定的內容。
6、結題,提供實(shí)驗原始結果和分析結果、實(shí)驗流程、實(shí)驗條件等等。
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